可以從這幾個(gè)方面一一考慮：

　　1.設(shè)計(jì)的抗原與被免疫的動(dòng)物內(nèi)源蛋白有極高的同源性或者抗原是免疫原性極差的小分子物質(zhì)。對(duì)于前一種情況應(yīng)該重新設(shè)計(jì)抗原，設(shè)計(jì)抗原時(shí)盡量選取目標(biāo)蛋白特異性的序列，可以設(shè)計(jì)短肽然后與載體蛋白偶聯(lián)之后免疫;對(duì)于后一種情況，首先確認(rèn)小分子物質(zhì)是否已經(jīng)正確和載體蛋白偶聯(lián)，如果偶聯(lián)沒有問題，可以更換其它的載體蛋白，一般來說KLH 是所有載體中優(yōu)先考慮的蛋白

　　2.免疫的周期不正確。免疫周期過長(zhǎng)或過短，各免疫步驟之間的間隔過長(zhǎng)或過短都有可能影響免疫效果。

　　3.免疫佐劑不合適。TiterMax 等佐劑在免疫時(shí)，對(duì)于某些抗原可能效果不佳，弗低佐劑也不能保證完全有效，此時(shí)可以考慮更換佐劑嘗試。

　　4.免疫劑量不合理。過大的免疫劑量可能導(dǎo)致免疫耐受，過少的免疫劑量可能無法激活免疫應(yīng)答。

　　5.免疫途徑不合理。對(duì)于有些免疫原性弱的抗原，可以考慮脾內(nèi)免疫方法。

　　6.測(cè)效價(jià)的過程存在錯(cuò)誤操作，尤其考慮包被是否成功或二抗使用是否正確。同時(shí)，一抗(即血清)稀釋梯度盡量放寬，一般建議從1：200或1：1000開始作梯度稀釋。對(duì)于小分子物質(zhì)，效價(jià)達(dá)到1：2000仍可視為免疫功。