為何有些抗體做WB檢測到的條帶與理論大小相比有區(qū)別?

　　導(dǎo)致這一結(jié)果的主要原因有：

　　1.天然蛋白存在某些修飾情況，如磷酸化、糖基化等，這些修飾都會導(dǎo)致蛋白質(zhì)的分子量增加。

　　2.有些蛋白存在不同的isform，每個isform得到的蛋白大小都有所差別。

　　3.氨基酸組成，不同氨基酸所帶電荷不一樣，導(dǎo)致相對電荷不同，遷移率有所差異，通過SDS-PAGE電泳檢測的大小會有所偏差。

　　4.多聚體(二聚、三聚等)，多聚體形式的蛋白常常會抵制WB所做的還原條件，還原不完全等會導(dǎo)致檢測條帶偏大。

　　5.翻譯后的剪切，有些蛋白以前體的形式合成或者帶有信號肽，翻譯后剪切掉前肽或者信號肽，導(dǎo)致檢測條帶變小。